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抗核抗体ANA及其荧光图形分享

16067 64 0 2019年09月11日

ANA定义

抗核抗体(ANA)是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。[并不是单一成分]

ANA的性质主要是IgG,也有IgM、IgA和IgD。其无器官和种属特异性,故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应。

ANA主要存在于血清中,也可存在于胸腔积液、关节滑膜液和尿液中。

ANA在未治疗的SLE患者中的效价较高,在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,如SLE、RA、混合性结缔组织病(MCTD)、干燥综合征(SS)、 硬皮病、慢性活动性肝炎,正常老年人也可有低效价的ANA。ANA阳性并不一定患有自身免疫性疾病。

由于细胞核成分的复杂性,不同成分的抗原性不同,因此可产生多种类型的ANA,在其众多类型中,作为针对某一特定核成分的个别抗体,只在某一疾病中出现,成为诊断该疾病的血清标志性抗体。各种ANA在不同的自身免疫性疾病中出现不同组合,可形成各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。因此总的ANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个极为重要的筛选试验,ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都具有重要意义。

ANA命名

目前按细胞内分子理化特性与抗原分布部位将ANA分为四大类:

A、抗dsDNA抗体
B、抗组蛋白抗体
C、抗非组蛋白抗体
D、抗核仁抗体

每一大类又因不同的抗原特性再分为许多亚类。

在临床检测中ANA的命名通常按以下三种方式进行:

1.根据抗原的化学名称命名,如抗dsDNA、抗RNP、抗DNP抗体、抗核小体抗体等。

2.以第一位检出该抗体的患者命名,如抗Sm、抗Ro、抗La抗体。

3.以相关疾病命名,如抗SSA、抗SSB抗体。

ANA筛选试验

最常用ANA筛选试验为IIF(间接免疫荧光法)【几乎每年都考请记住】

IIF 检测在过去最常用小鼠肝细胞印片作为抗原。
目前最常用的是核质丰富的培养细胞- HEp2细胞作为抗原。培养HEp2细胞作为抗原固定于载玻片上,与受检血清反应,血清中ANA与核抗原结合,形成抗原-抗体复合物,此时再加人FITC标记的抗人IgG,反应后,标记抗人IgG与抗原-抗体复合物结合形成标记抗体-抗原-抗体复合物,在荧光显微镜下可观察到抗原片上ANA荧光着染强度和免疫荧光图形。

ANA常见荧光图形

1.均质型(H):
细胞核均匀着染荧光,有些核仁部位不着色,分裂期细胞染色体可被染色出现荧光。
与均质型相关的自身抗体主要有抗不溶性DNP抗体,抗组蛋白抗体、抗dsDNA抗体也可产生均质性。

高效价均质型主要见于SLE患者,低效价均质型可见于RA、慢性肝脏疾病、传染性单核细胞增多症或药物诱发的狼疮患者。


2.斑点型(S) :细胞核内出现颗粒状荧光,分裂期细胞染色体无荧光显色。
与斑点型相关的自身抗体涉及抗核糖体核蛋白颗粒抗体,如抗Sm、抗Ru1RNP、抗SSB/La等抗体。

高效价的斑点型常见于MCTD,同时也见于SLE、硬皮病、SS等自身免疫性疾病。
3.核膜型(M):又称周边型, 荧光着色主要显示在细胞核的周边形成荧光环,或在均一的荧光背景上核周边荧光增强;分裂期细胞染色体区出现荧光着色。相关抗体主要是抗dsDNA抗体。

高效价的周边型几乎仅见于SLE,特别是活动期SLE,其他自身免疫疾病很少见周边型,因此周边型对SLE的诊断价值极大,且提示病情活动。
4.核仁型( N):荧光着色主要在核仁区,分裂期细胞染色体无荧光着色。相关抗体是抗核仁特异的低分子量RNA抗体,抗RNA聚合酶-1抗体、抗U3RNP抗体、抗PM-Sc1抗体。

核仁型在硬皮病中出现率最高,尤其是高效价核仁型对诊断硬皮病具有一定特异性,但核仁型也见于雷诺现象者,偶尔也出现于SLE。

ANA常见荧光图图谱

  • 均质型(H),HEp-2细胞,FITC染色,X200均质型(H),HEp-2细胞,FITC染色,X200:多见于系统性红斑狼疮病人。如ANA筛选试验呈现此种荧光染色模型,应进一2步应用特异性的检测方法检测抗组蛋白抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体和抗核小体抗体等。
  • 斑点型(S),HEp-2细胞,FITC染色,X200斑点型(S),HEp-2细胞,FITC染色,X200:如ANA筛选试验呈现此种荧光染色模型,应进一步应用特异性的检测方法检测抗可溶性核抗原抗体(ENA),如抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Sm抗体和抗RNP抗体等。
  • 核膜型或周边型(M),HEp-2细胞,FITC染色,X200核膜型或周边型(M),HEp-2细胞,FITC染色,X200
  • 核仁型(N),HEp-2细胞,FITC染色,X200核仁型(N),HEp-2细胞,FITC染色,X200

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