一、抗酸染色一般步骤
1.石炭酸复红,2.3%盐酸酒精,3.碱性美兰
1)初染
用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。
2)脱色
3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。
3)复染
用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
二、读片方法
首先从左至右观察相邻的视野, 当玻片移动至痰膜一端时,纵向下移换一个视野,然后从右向左观察,像犁地一样,反复阅读而不重复,通常1 0 mm X 20 mm 大小的痰膜,使用100 倍油镜,每行可观察1 00个视野,观察3 行则约为3 00 个视野,仔细观察完300 视野(一般至少需要5 min 以上) , 若未发现抗酸杆菌,才作出阴性报告。
三、结果报告
(1) 阴性(-) : 连续观察300 个不同视野未发现抗酸杆菌。
(2) 阳性(+) : 1 ~ 10 个/ 100 视野。
(3) 阳性(++) : 1 ~ 10 个/ 10 视野。
(4) 阳性(+++) : 1 ~ 10 个/每个视野。
(5) 阳性(++++) : 注10 个/每个视野。
四、 室内质控
(1) 染色液每周质控1 次。
(2) 镜检结果抽查复检至少应每季1次。
(3) 痰涂片保存供有关部门质量检查。
1.阴性培养8 周时仍未见菌落生长,可报告分枝杆菌培养阴性,斜面无菌落生长。
2.阳性
(1) 报告分枝杆菌菌落数,菌落生长不足斜面面积1 /4.
(2) 分枝杆菌培养阳性(+) ,菌落生长占斜面面积1 / 4 。
(3) 分枝杆菌培养阳性(++) ,菌落生长占斜面面积1/2 。
(4) 分枝杆菌培养阳性(+++) ,菌落生长占斜面面积3 / 4 。
(5) 分枝杆菌培养阳性(++++ ),菌落生长布满斜面。
巧记:1+到4+,分别是1/4-4/4